Legionella, innovador método de detección rápida a partir de muestras de aire
Detectar la bacteria Legionella pneumophila en muestras de aire ya es posible mediante LegionAir-Detect, una tecnologia desarrollada y patentada por el grupo BIOMAT de la Universidad Politécnica de Madrid. El método, basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), ha demostrado eficacia, rapidez y alta sensibilidad para detectar ADN de la bacteria a partir de varias muestras de aire recolectadas en Madrid, lo que abre la posibilidad de muestreos continuos de aire en áreas urbanas para prevenir brotes de legionelosis.
Legionella en el aire
La detección ambiental de la bacteria Legionella pneumophila, principal agente causal de la legionelosis en Europa, se ha realizado hasta ahora básicamente a partir de muestras de agua. Sin embargo, la via más habitual de contagio por Legionella pneumophila es la inhalación de aerosoles que contienen la bacteria, y que suelen provenir de dispositivos e instalaciones que utilizan agua en su funcionamiento, como fuentes ornamentales, piscinas o torres de refrigeración.
El grupo BIOMAT, de la Universidad Politécnica de Madrid, ha desarrollado una nueva tecnología de detección de Legionella pneumophila que supone una novedad al analizar directamente el medio por el que se transmite la bacteria: el aire.
LegionAir-Detect es un método molecular de detección de Legionella pneumophila en aerosoles, y otras muestras ambientales o clínicas, basado en la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), con resultados en menos de 24 horas. Sin necesidad de cultivo previo, la detección específica de L.pneumophila se realiza mediante dos PCR consecutivas, realizadas a partir de muestras de aire exterior filtrado u otro tipo, aportando gran versatilidad.
Detección molecular de L. pneumophila
La base fundamental de este nuevo método es un proceso de dos PCRs consecutivas a partir de DNA extraído directamente de las muestras, para detectar una sección específica del gen 16S rRNA de la bacteria Legionella pneumophila.
La primera PCR se realiza sobre la muestra de aire exterior mediante un par de cebadores que amplifican una region específica del gen 16S rRNA de la bacteria y aumentan el número de copias de la región génica que contiene la secuencia de interés. A continuación se realiza una PCR anidada utilizando un par de cebadores específicos de la especie Legionella pneumophila, que se unen a una región del gen 16S rRNA amplificada en la primera PCR.
El método se probó con muestras de aire exterior recolectadas en Madrid y permitió detectar específicamente la bacteria patógena Legionella pneumophila, a pesar de una baja concentración de ADN en las muestras utilizadas
Las muestras de aire se caracterizan por estar compuestas de diferentes tipos de partículas, entre las que se encuentran múltiples microorganismos y de distinta naturaleza (bacterias, virus, esporas de hongos…). A pesar de esta gran diversidad, la cantidad de DNA total de las muestras analizadas fue muy baja: < 0.280 ng/μL, y la bacteria Legionella pneumophila, de estar presente en la muestra, representó <0.3% de las secuencias genéticas detectadas.
No obstante, a pesar de la escasez de material genético, el método pudo detectar la bacteria en las muestras que la contenían, lo que muestra una alta sensibilidad de esta tecnología para detectar específicamente la bacteria Legionella pneumophila.
